目前，流感病毒仍然是威脅人類公共衛(wèi)生健康領(lǐng)域的重要呼吸道病原之一，季節(jié)性流感爆發(fā)或偶發(fā)的流感病毒跨種傳播和大流行給人類健康和社會(huì)經(jīng)濟(jì)帶來重大影響。
疫苗免疫是預(yù)防流感病毒感染最有效的方法，當(dāng)前疫苗免疫策略主要通過誘導(dǎo)識別流感病毒血凝素蛋白HA的特異性中和抗體抵御病毒感染。
然而，流感病毒作為RNA病毒，基因組突變頻率較高，產(chǎn)生抗原漂移，或發(fā)生基因重排導(dǎo)致抗原轉(zhuǎn)換，針對上述流感病毒的潛在威脅，迫切需要研究新型、廣譜性的通用流感疫苗，以期實(shí)現(xiàn)對不同流感毒株的有效保護(hù)。
面對變化多端的流感病毒，有效激活針對病毒保守結(jié)構(gòu)區(qū)域的免疫應(yīng)答是實(shí)現(xiàn)廣譜性流感疫苗的有效方法，一系列研究在小鼠、雪貂等模型中證明靶向病毒保守結(jié)構(gòu)區(qū)域，如基質(zhì)蛋白M2或HA莖部區(qū)域的特異性抗體能夠有效治療或預(yù)防不同流感毒株的感染。
然而，相對繁瑣的免疫方式以及抗體引發(fā)的一些副作用等問題仍有待進(jìn)一步解決優(yōu)化。研究證實(shí)，在缺乏中和抗體的條件下，針對病毒保守結(jié)構(gòu)域的特異性T細(xì)胞應(yīng)答能夠有效介導(dǎo)針對不同毒株的交叉保護(hù)性反應(yīng)，提示特異性T細(xì)胞應(yīng)答反應(yīng)在新型廣譜性流感疫苗設(shè)計(jì)中的潛在價(jià)值。
中科院微生物所孟頌東團(tuán)隊(duì)十多年來長期從事熱休克蛋白gp96免疫學(xué)功能研究，該團(tuán)隊(duì)近期研究發(fā)現(xiàn)，以熱休克蛋白gp96為佐劑聯(lián)合商業(yè)性單價(jià)滅活H1N1流感疫苗免疫小鼠，能夠有效誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生針對H1N1、H3N2、H7N9等不同亞型流感病毒毒株的保護(hù)性免疫應(yīng)答。
進(jìn)一步免疫學(xué)機(jī)制研究表明，以gp96蛋白為佐劑聯(lián)合單價(jià)滅活流感疫苗免疫小鼠，能夠顯著增強(qiáng)疫苗特異性T細(xì)胞應(yīng)答反應(yīng)，有效誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生針對不同毒株的交叉反應(yīng)性CD8+ T細(xì)胞應(yīng)答，活化多個(gè)針對病毒結(jié)構(gòu)蛋白NP、HA、M1、PB1保守結(jié)構(gòu)區(qū)域的CD8+ T細(xì)胞應(yīng)答反應(yīng)。
免疫保護(hù)實(shí)驗(yàn)證明，這6個(gè)針對病毒保守結(jié)構(gòu)域的特異性T細(xì)胞表位可以發(fā)揮協(xié)同作用，共同介導(dǎo)gp96佐劑誘導(dǎo)的交叉保護(hù)。利用生物信息學(xué)方法比對3萬余株流感病毒序列，結(jié)果表明上述6種保護(hù)性T細(xì)胞表位能引發(fā)交叉保護(hù)應(yīng)答并在所有比對序列中高度保守（下圖），提示以gp96為佐劑的新型流感疫苗具有廣譜性應(yīng)用潛力。
圖例: 6個(gè)流感病毒保護(hù)性保守T細(xì)胞表位可引發(fā)對不同毒株的交叉免疫保護(hù)（A和B），以及在不同毒株中的序列比對結(jié)果（C）。
孟頌東團(tuán)隊(duì)利用漢遜酵母、昆蟲桿狀病毒等蛋白表達(dá)系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)了臨床級別重組gp96蛋白的快速大量制備（J Biotechnol. 151(4):343-9，2011）。下一步將在靈長類動(dòng)物模型中驗(yàn)證該疫苗的交叉保護(hù)潛力。鑒于T細(xì)胞應(yīng)答在清除病毒感染、介導(dǎo)交叉保護(hù)中的核心作用，以gp96為佐劑的新型廣譜性流感疫苗設(shè)計(jì)，也為其它重要傳染性疾病病原的新型佐劑疫苗研發(fā)提供了新的思路。
上述研究已經(jīng)在線發(fā)表在Journal of Virology ，論文的一作是張含，這是該研究組在新型通用流感疫苗研究方面發(fā)表的第二篇論文，前期研究已經(jīng)發(fā)表在Vaccine（32(23):2703-11（2014））。該研究得到中科院戰(zhàn)略性先導(dǎo)科技專項(xiàng)（B類）（XDB29040000）的資助。
https://jvi.asm.org/content/early/2021/04/02/JVI.00507-21
