免疫系統(tǒng)人源化小鼠模型是免疫療法藥效實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)，與僅有T細(xì)胞重建的PBMC模型相比，CD34+臍血干細(xì)胞常用于全組分免疫系統(tǒng)重建。然而，這一模型存在大量不盡如人意的問題，但其中最主要的問題之一在于供體特征難以提前檢測(cè)，GVHD，藥效等都難以提前進(jìn)行預(yù)測(cè)。鑒于PBMC模型可以方便的預(yù)測(cè)不同供體的藥效、與腫瘤細(xì)胞的匹配程度以及其引發(fā)GVHD的能力，實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性較高，創(chuàng)模生物近日大幅度改進(jìn)了PBMC模型。我們基于hIL-15NSG小鼠，大幅度優(yōu)化了PBMC免疫系統(tǒng)人源化小鼠模型，實(shí)現(xiàn)了接近臨床水平的NK重建。創(chuàng)模二代PBMC模型具有以下特征：1、PBMC重建大幅度加速。人總淋巴細(xì)胞可在1周內(nèi)重建至小鼠外周血總免疫細(xì)胞的10-20%，2周時(shí)可達(dá)到30%-60%。絕對(duì)計(jì)數(shù)分析，人CD45+%免疫細(xì)胞數(shù)量在接種一周內(nèi)即開始呈指數(shù)增長。T細(xì)胞重建趨勢(shì)與總淋巴細(xì)胞相同。圖1. 二代PBMC模型接種后，總?cè)肆馨图?xì)胞及T細(xì)胞重建情況。2、NK可實(shí)現(xiàn)大量重建，其占人CD45免疫細(xì)胞比例在2周時(shí)可達(dá)平均10%左右。占小鼠總淋巴細(xì)胞比例2周時(shí)可達(dá)4%左右（圖2），接近人外周血NK細(xì)胞比例。其NK細(xì)胞數(shù)量也呈指數(shù)增長。圖2. PBMC接種2周后，小鼠外周血種各類淋巴細(xì)胞重建情況。圖3. 創(chuàng)模二代PBMC模型中NK細(xì)胞重建的絕對(duì)計(jì)數(shù)。3、在該模型中，B細(xì)胞、單核細(xì)胞也得到了維持，且有一定的擴(kuò)增。值得注意的是，在該模型中，B細(xì)胞源于健康人外周血中成熟的B淋巴細(xì)胞。 圖4. 創(chuàng)模二代PBMC模型中B細(xì)胞，Mono細(xì)胞的重建情況。4、在該模型中，mDC細(xì)胞也有一定殘余。在接種后2周時(shí)小鼠外周血中可檢測(cè)到較為明確的樹突細(xì)胞存在。圖5. 創(chuàng)模二代PBMC模型中mDC細(xì)胞維持情況。5、該模型的GVHD強(qiáng)度與同一供體的傳統(tǒng)PBMC模型無顯著差異。由于其在一周內(nèi)即實(shí)現(xiàn)較高的PBMC重建，可在接種PBMC后立即開始用藥。不同供體重建后3周內(nèi)均未出現(xiàn)顯著的GVHD，5周內(nèi)未出現(xiàn)動(dòng)物死亡。給藥窗口期可達(dá)到4-5周。與此同時(shí)，PBMC模型依然可以通過預(yù)實(shí)驗(yàn)篩選供體的GVHD情況，選擇GVHD潛力較低的模型用于藥效實(shí)驗(yàn)。圖6. 創(chuàng)模二代PBMC模型在重建后體重變化。6、相關(guān)模型上腫瘤可以正常生長。A375生長1周后接種PBMC。生長曲線未受PBMC重建影響。PBMC重建已達(dá)平均55%。圖7. 在二代PBMC模型上A375腫瘤生長曲線。創(chuàng)模生物業(yè)已進(jìn)行多批次不同供體的二代PBMC免疫系統(tǒng)人源化小鼠預(yù)實(shí)驗(yàn)，該模型重建速度及穩(wěn)定性遠(yuǎn)超于常規(guī)PBMC模型，且能夠?qū)崿F(xiàn)臨床水平的NK細(xì)胞重建。同時(shí)，多種免疫細(xì)胞在該模型上可以有效維持。包括成熟的人B淋巴細(xì)胞及DC細(xì)胞。創(chuàng)?；诖罅恐亟ǚ椒▋?yōu)化，使用hIL-15小鼠成功實(shí)現(xiàn)全組分PBMC免疫系統(tǒng)重建。該模型具有生理水平的NK細(xì)胞重建及穩(wěn)定快速的T細(xì)胞重建，可以更好的用于：
同時(shí)，由于該模型具有成熟的B淋巴細(xì)胞，單核細(xì)胞及DC細(xì)胞的重建，具備模擬人類抗原遞呈過程的潛力，相關(guān)模型或可用于更多免疫療法方案的人源化模型應(yīng)用。
創(chuàng)模生物已經(jīng)充分掌握領(lǐng)先的NK細(xì)胞重建技術(shù)，相關(guān)方案可用于CAR-NK細(xì)胞療法藥效實(shí)驗(yàn)。
